作业帮蛋白质印迹法中为什么不直接在1抗中作标记而在2抗中作标记,这不是多此一举么?先谢过了!
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/02 17:31:23
蛋白质印迹法中为什么不直接在1抗中作标记而在2抗中作标记,这不是多此一举么?先谢过了!
蛋白质印迹法中为什么不直接在1抗中作标记而在2抗中作标记,这不是多此一举么?先谢过了!
蛋白质印迹法中为什么不直接在1抗中作标记而在2抗中作标记,这不是多此一举么?先谢过了!
是这样的：如果一抗上直接加标记,不但不能保证抗体抗原反映的特异性,也不能保证实验的可重复性.
首先,由于抗体都是人工去设计的,对于一个人工设计的蛋白质来说,你可以设计一个很好的抗体与他结合；然而对于天然蛋白质,你不能保证一个很高的识别率和准确度.所以,针对1抗,我们可以设计出完美的2抗,然而针对原蛋白质,你无法设计一个特别完美的1抗.所以,直接标记1抗的出来的结果是不准确的,而标记2抗是相对于1抗直接标记来说更准确的,所以经过大量的实验之后人们抛弃了直接标1抗的方法.当然,标2抗也不是完全完美的,当然你也可以标3抗,4抗,不过那个成本就指数上升了,在保证一定的置信度的情况下,人们一般标到2抗就够了.
其次,对于同一个抗原,不同来源的1抗所识别的位置可能会有很大差异.这样,你就无法保证试验的可重复性.而1抗作为抗原来讲,可以将它的抗原决定簇设计的一样,这样针对不同的1抗,2抗是可以保证差不多一个样子的.而且这也给节约成本和方便标记带来了方便.
所以一般现在都是2步标记,第一个原因是主要的,第二个原因是次要的.希望对你有帮助.
因为价格的关系，本来一抗就比较贵了，还要每种一抗都要做标记的话就更加的费钱，而且一抗的质量并不一定有保证，而二抗反正可以用来识别很多很多种一抗，价格也相对便宜，一般质量都是有保证的，所以标记二抗好一点吧
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