我现在要做免疫共沉淀检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用,我是个新手,从来没做过,我看过一些文献,文献上说的做法大都不太一样,我有点糊涂了.我想问一下,是不是先提蛋白,然后做免疫沉

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/10 18:19:32

我现在要做免疫共沉淀检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用,我是个新手,从来没做过,我看过一些文献,文献上说的做法大都不太一样,我有点糊涂了.我想问一下,是不是先提蛋白,然后做免疫沉
我现在要做免疫共沉淀检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用,我是个新手,从来没做过,我看过一些文献,文献上说的做法大都不太一样,我有点糊涂了.我想问一下,是不是先提蛋白,然后做免疫沉淀（加入抗体）做电泳看看蛋白质之间是否有作用就可以了还是需要做更复杂的?请求专业人士解答一下谢谢!

这个过程简单讲就是这么几步：

抽蛋白

挂抗体到beads上,做成有亲和力的柱子（其实所谓“柱子”就是带有抗体的beads装到Ep管里）

抽出来的蛋白去和柱子孵育,抗体识别的蛋白和与此蛋白互做的蛋白就挂到柱子上了

洗涤,将抗体不能结合的蛋白洗掉

洗脱,可以用蛋白电泳上样缓冲液将beads上的抗体,蛋白,蛋白结合蛋白一起洗下来

电泳

WB检测

之所以叫免疫沉淀,是因为利用了抗体的亲和力,所以叫免疫,而沉淀的意思就是指,抗体挂到beads上,液体里面的物质用固相的beads可以分离出来,所以叫做沉淀.

而上面的7个步骤又会根据实际试验的情况发生变化.所以你看到文献上怎么做的人都有.

如果感兴趣,我建议你可以先读一些general的protocol,例如：http://www.piercenet.com/files/TR0064-Immunoprecipitation-guide.pdf ,再根据自己的实际状况或者是实验的结果再进行选择.

我现在要做免疫共沉淀检测蛋白质与蛋白质之间的相互作用,我是个新手,从来没做过,我看过一些文献,文献上说的做法大都不太一样,我有点糊涂了.我想问一下,是不是先提蛋白,然后做免疫沉蛋白和RNA的共沉淀要做蛋白A和miRNA的免疫共沉淀,蛋白是上游,可是看到免疫共沉淀都是蛋白与蛋白之间的作用,这个做RNA的怎么做啊? 做染色体免疫共沉淀（CHIP）一般要多少钱啊? 利用免疫细胞技术怎样检测某种特定蛋白质免疫共沉淀可以检测基因蛋白表达吗? 免疫共沉淀中相结合的两蛋白质是如何分离的我看IP的实验步骤中,最后都没有将两个蛋白质分开的步骤,难道是在前面的步骤中相结合的两个蛋白质自己已经分开了吗?为什么呢?如若不是,难道免疫共沉淀与免疫沉淀区别希望说简单点, 设计实验证实并验证未知蛋白质~这个是一年的考试题,感激不尽!分不多,心很诚!实验室通过免疫共沉淀技术分离到一种未知蛋白质,请设计实验方案,利用多种实验技术证实是何种蛋白质并进行蛋白质电泳的目的虽然问题有点大但我还是很想知道为什么要做蛋白质电泳电泳究竟是检测什么东西求做染色质免疫共沉淀的原理和大致步骤染色质免疫共沉淀技术Chromatin Immunoprecipitation能做什么用? 做可溶性还原糖与蛋白质的检测实验,化学试剂的用法有何不同如何检测蛋白质变性蛋白质用什么检测? 怎么样检测蛋白质二聚体如何利用免疫荧光技术检测某个蛋白质在体内的含量和分布双缩脲试剂只能用来检测生物做之中的蛋白质吗豆浆的不行吗是生物组织... 博奥森生物有限公司的试剂好用吗?现在要做免疫组化检测2个因子,