目前一般的PCR产物大小是多少呢,是不是上1.5kb的序列就不好P出来了呢我的5'端重复序列相当多,设计得到的PCR产物因该是1.5Kb左右,但是跑胶验证的才750bp 各位大侠帮我出出主意,咋能得到

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 05:48:16
目前一般的PCR产物大小是多少呢,是不是上1.5kb的序列就不好P出来了呢我的5'端重复序列相当多,设计得到的PCR产物因该是1.5Kb左右,但是跑胶验证的才750bp 各位大侠帮我出出主意,咋能得到

目前一般的PCR产物大小是多少呢,是不是上1.5kb的序列就不好P出来了呢我的5'端重复序列相当多,设计得到的PCR产物因该是1.5Kb左右,但是跑胶验证的才750bp 各位大侠帮我出出主意,咋能得到
目前一般的PCR产物大小是多少呢,是不是上1.5kb的序列就不好P出来了呢
我的5'端重复序列相当多,设计得到的PCR产物因该是1.5Kb左右,但是跑胶验证的才750bp 各位大侠帮我出出主意,咋能得到比较完整的序列

目前一般的PCR产物大小是多少呢,是不是上1.5kb的序列就不好P出来了呢我的5'端重复序列相当多,设计得到的PCR产物因该是1.5Kb左右,但是跑胶验证的才750bp 各位大侠帮我出出主意,咋能得到
如果重复序列比较多,还是请选择再延长一点5’段,避免引物错配.
一般的PCR体系用来扩增800bp以内的片段效果还可以,上了1000bp,我们都推荐使用LATaq酶,或者其他长片段酶,并延长退火时间,保证长片段可以完整复制.
请你查查你的序列,看看750bp处是否有容易与引物错配的序列,如果没有,延长退火时间、降低退火温度试试;如果有,降低退火温度或者从新设计引物吧.

500-2K的比较多
一般来说2K以上就算长片段PCR了…普通的PCR酶活性、错配什么的问题就严重了
所以这个时候要考虑买贵点的酶了…偶实验室用的TaKaRa的,ExTaq扩4K以内的没问题的,更贵的有个给长片段PCR专用的酶LATaq,号称能P 31K的,偶只拿来P过8500的一个片段,效果很不错...

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500-2K的比较多
一般来说2K以上就算长片段PCR了…普通的PCR酶活性、错配什么的问题就严重了
所以这个时候要考虑买贵点的酶了…偶实验室用的TaKaRa的,ExTaq扩4K以内的没问题的,更贵的有个给长片段PCR专用的酶LATaq,号称能P 31K的,偶只拿来P过8500的一个片段,效果很不错

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现在的酶都挺好用的,一般p个几kb没问题的呀?

目前一般的PCR产物大小是多少呢,是不是上1.5kb的序列就不好P出来了呢我的5'端重复序列相当多,设计得到的PCR产物因该是1.5Kb左右,但是跑胶验证的才750bp 各位大侠帮我出出主意,咋能得到 如何知道PCR产物的大小 请教 做染料法荧光定量PCR,熔解曲线分析,如何区分目的基因产物和引物二聚体呢?是不是一般峰比较高的那个就是目的基因产物了? 普通的PCR,产物的长度一般要求多大合适 为什么质粒与PCR产物一同跑电泳,质粒会比PCR产物跑的快呢?质粒是用水溶的 使用SYBR green做定量PCR的话产物片段太大会怎么样?最适大小是多少? pcr产物电泳一般需几微升点样?2微升的时候没有条带是否说明就没p出来呢? PCR产物作为模板继续PCR反应,稀释前后产物不同,怎么回事?A、B均为一次PCR产物 再次PCR的条带,A为直接一次PCR产物作为模板,B为稀释100倍后.图中mark为DL10000,一次PCR产物大小1400bp,A的条带与模板大 高保真酶,PCR末端加A原理Takara的高保真酶,exTaq,有3‘-5’外切活性,说明书上又说能在pcr产物末端加A,什么原理呢?是不是在里面混了普通taq酶? 我想问一下菌落pcr产物的大小是怎么组成的? PCR产物问题如图~第一张是taq酶跑出来的条带~有产物,大小780bp~marker是DL2000而第二次是高保真酶跑出来的电泳图,没有我的目的产物,只有很多二聚体这是为什么呢?我用的引物都是一样的~2次PCR PCR扩增的产物中是不是也含有引物设计中的序列啊 就目前一般测量员的工资是多少? 一般说,PCR 扩增产物片段长度 包不包括引物在内?荧光定量PCR扩增长度一般为80到150 ,我想知道包不包括引物的长度? PCR产物小于100bp是什么原因?为什么我希望得到300bp的PCR产物,却得到小于100bp的片段呢? 关于细菌PCR扩增产物的问题,PCR扩增产物有特异性条带,怎么修改PCR程序消除?以及PCR程序是不是有问题,PCR程序应该怎么改?DNA可以用来做PCR吗?3.PCR反应程序细菌16SrDNA V3区扩增:95°C 5min;93°C 30 PCR产物的空白,老是有条带,怎么样防止污染呢? 请问pcr产物测序后,如何确定从哪开始是我要的序列呢?